بداية العينة المفضلة لتحليل الكالسيوم الكلي هي المصل، أي تجمع بأنبوب بدون أي موانع للتجلط، من المهم أن تبقى عينة المصل لأيونات الكالسيوم مغطاة حتى قبل عمل التحليل مباشرة، لأن نقص غاز ثاني أكسيد الكربون يؤدي إلى الزيادة في الرقم الهيدروجيني أي يصبح مائل للقاعدية فيتسبب بتغيرات في ترابط البروتين.
هذا التحليل لا يتطلب الصيام، ولكن يفضل التوقف عن استخدام بعض الأدوية، مثل: أدوية الليثيوم، ومضادات الحموضة، والأدوية المدرة للبول، ومكملات فيتامين د الغذائية وذلك من أجل الحصول على أفضل النتائج.